Glue

活化辣根過氧化物酶

(B 型）

貯存條件：

低溫運輸，-20℃貯存，有效期一年。

生產日期：見包裝

●產品簡介     

※  Galaxybio 公司研發的活化HRP，對優質辣根過氧化物酶次序偶聯，再活化，使辣根酶富含活性基團。一經活化的HRP，極易和含氨基NH2的小分子或蛋白氨基NH2的共價結合。因此使用本方法標記物，具有標記率高、活性好、本底低及非常敏感等特點。敏感性一般是傳統過碘酸法標記3~5倍。微量包裝的活化HRP，特別適合科研用的昂貴抗體的標記。也適合抗體抗原活性的檢測。

※  一步標記，簡便快速。與待記抗原或抗體混合后（約12個小時過夜標記或37℃2小時。）

※  可以微量標記，節省昂貴的抗原抗體

※  無需透析，即時使用；

※  標記率極高，可大于95%；敏感性一般是傳統過碘酸法標記3~5倍。

※  本試劑盒針對氨基進行標記，故只對含有氨基的分子�？梢赃M行抗原或其他蛋白的標記。小分子的標記，如瘦肉精、DNA、多肽等等，標記時，如要提高HRP的利用率，可以加入過量的小分子，然后透析除去游離的小分子；如果要即時使用，參考蛋白抗原的標記，減少小分子的用量，從而減少游離的小分子。

※  本底遠遠低于其它方法。

●注意事項：

1. 抗原抗體如果是存在于硫酸銨、甘氨酸或Tris緩沖液中，需以PBS緩沖液充分透析，也可以超濾離心管進行超濾；微量的含NH2 的小分子，會嚴重影響標記率。

2. 反應體系一般100μl～300ul /1mgHRP；太小，可能發生自身交聯；也不要太大，太大會影響標記率。

3. REAGENT Ⅲ 終止液，封閉殘余活化基團。

4. 注意反應 pH值約維持在9.5左右。pH值太低，多加反應啟動劑。

5.特別提醒，是后續試驗中，酶標板條種類不同，本底差異特別大。當本底高時，以較高濃度蛋白溶液封閉的酶標板，同時把酶標稀釋液的蛋白濃度加大。如果問題依舊存在，請聯系我們技術咨詢。

6 本試劑僅用于科學研究；

●操作步驟：

以1mg活化HRP，標記抗體為例（反應體系根據HRP的mg數相應增加）

        1. 準備待標記物：以蒸餾水或超純水把待標記物溶解成約1mg/ml。

2. 取100ul抗體溶液（1mg/ml）轉入REAGENT Ⅰ活化辣根氧化物酶。

※簡短離心，使辣根過氧化物酶沉到管底，辣根酶管壁上的干粉HRP要完全沖洗溶解。

※總的反應體系控制在100ul/mg活化HRP左右，體系增大影響標記率。

※按照按mg活化HRP對應抗體100ug～500 ug、抗原50ug～250ug，HRP：X的分子mol比保持在30:15～1左右。