辣根過氧化物酶
Horseradish Peroxidase
(酶標記專用)
貨號 |
包裝規格 |
Cat:CH0202 |
10mg |
Cat:CH0203 |
100mg |
Cat:CH0204 |
1g |
貯存:4℃保存,穩定期不低于3年。
產品簡介:
Galaxybio公司生產的辣根過氧化物酶是以辣根為原料,經過水的抽提,硫酸銨和丙酮分級分離,再經鋅離子純化,離子交換層析,透析除鹽,冰凍干燥,得到高純度高活力的辣根過氧化物酶。
本產品是用于酶標記的專用HRP,高純度、高活力、不含影響標記的小分子,標記率高,活性不低于國外知名品牌。
主要技術指標:
RZ:>3.0,
活性:>300 IU/mg
水溶解度:c >50 mg/ml
過氧氫酶:<0.005
其他過氧化物酶 <0.00005
HRP 背景資料:
辣根過氧化物酶 (horse radish peroxidase,簡稱HRP,EC.1.11.1.7)。HRP廣泛地分布于植物界,以辣根中含量最高。它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉輔基組成的一種糖蛋白,含糖量18%,由300個氨基酸和4個二硫鍵連接而成。分子量40 000,等電點5.5~9.0之間,它催化的最適pH因供氫體不同而有所差異,但多在pH5.0左右。HRP易溶于水和58%以下的飽和硫酸銨溶液。
HRP酶蛋白和其它雜蛋白的最大吸收光譜為275nm,輔基部分的最大吸收光譜為403nm,二者比值OD403/OD275為酶的純度。以RZ值(Reinheit Zabl德文)表示。RZ>3為高質量,RZ>2.5為中等質量,RZ<2.5則需要純化。
HRP 活性測定:
以愈創木酚(鄰甲氧基酚,guaiacol)為氫給體,光程1cm,每分鐘A470nm增加0.001所需酶量定為1個HRP活力單位.用作標記的過氧化物酶活性一般要大于250units/mg。
HRP 常見底物:
供 氫 體 |
顯色 |
波長 |
終止劑 |
顯色 |
測定波長 |
TMB |
蘭 |
630 |
2M H2SO4 |
黃 |
450 |
聯大茴香胺(OD) |
桔紅 |
512 |
5M HCI |
黃 |
400 |
鄰苯二胺(OPD) |
黃 |
444 |
2M H2SO4 |
桔黃 |
492 |
鄰苯甲苯胺(OT) |
蘭 |
636 |
2M H2SO4 |
黃 |
442 |
數種顏色反應底物中,TMB因其靈敏度較高及無致癌性而得到廣泛應用,OPD等等其他有致癌作用,使用時需注意 |